IHC免疫组化检测（细胞爬片）

详情描述：

实验步骤
 
1. 将已消毒的20mm盖玻片置于90mm培养皿中，按2?104 /ml的细胞密度将细胞接种于培养皿中进行细胞爬片，5天后进行***细胞组织化学染色鉴定。
2. PBS清洗标本 3次各 1 min。
3. 冰丙tong固定 15 min。
4. 空气干燥 5min。
5. PBS清洗标本 3次各 2 min。
6. 0.5%Triton X-100(DPBS配) 孵育 1次 20 min。
7. PBS清洗标本 3次各 2 min。
8. 3%H2 O2 孵育 15 min。
9. DPBS清洗标本 3次各 2 min。
10. 封闭血qing孵育(5%正常二抗血qingDPBS液)20min。
11. 一抗孵育(PBS配，滴度1：200，湿盒)4℃过夜或37℃ 60 min。阴性对照用一抗来源血qing，否则用PBS液
12. PBS清洗标本 3次各 5 min。
13. 二抗工作液孵育(湿盒) 37℃，30 min。
14. PBS清洗标本 3次各 5 min。
15. C液(湿盒) 37℃，30 min。
16. PBS清洗标本 3次各 5 min。
17. DAB显色(避光，镜下观察至棕色)约3~10min。
18. 蒸馏水洗 2次 1 min。
19. ***素复染 0.5~1min。
20. 自来水洗 30min。
21. 树胶封片。