Edu细胞增殖检测
EdU可以在DNA复制的时候掺入到新合成的DNA链中,通过一个“Click”反应,把荧光基团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样我们就能通过检测荧光而知道细胞的增殖情况了。
操作步骤
1.
细胞培养：取对数生长期细胞，以每孔4?103~1?105细胞接种于96孔板中，培养至正常生长阶段
2.
药物处理：根据实验需要进行各种药物处理
3.
EdU标记：用细胞培养基按1000：1的比例稀释EdU溶液 (试剂A)，制备适量50μM EdU培养基；
注：1)EdU浓度与孵育时间相关，短时间孵育(<2h)宜采用高浓度(10~50
μM)，长时间孵育(>24h)宜采用低浓度 (1~10μM)；
a.如果需配置10μM EdU培养基，需调整为5000：1稀释比例；
b.配置好的培养基的保存时间取决于培养基的性质。
4.
细胞固定
5.
Apollo染色
6.
图像获取及分析
客户提供
1.提供新鲜的肝素或者EDTA抗凝的外周血；
2.提供新鲜的培养细胞，提供新鲜组织，需要实验室制备成单细胞悬液。
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