腺病毒包装

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腺病毒包装
1.服务介绍
腺病毒是目前高效且可靠的重组病毒表达系统之一，可用于在哺乳细胞中瞬时及高水平地表达shRNA或目的蛋白。腺病毒其具备以下优点：宿主范围广。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞，除可感染几乎所有人的细胞类型外，还可感染包括大鼠、小鼠、兔、猪、羊、猴、鸡等物种。因腺病毒的感染不依赖细胞周期，故其既可以感染增殖细胞也可以感染非增殖细胞。腺病毒具有嗜上皮细胞特性，因大多数肿瘤细胞均属于上皮细胞，这使得腺病毒非常适合应用于基因治疗领域。病毒滴度高，可用于动物水平的实验。有较好的生物安全性。腺病毒携带的基因不会整合到宿主细胞基因组中；实验中虽然会有一定机率出现RCA（即复制型腺病毒），但由于大多数成人体内都有针对腺病毒的抗体，所以一般危害不大。
腺病毒(Adenovirus，Ad)是一种无包膜的线状双链DNA病毒，其复制不依赖于宿主细胞的分裂。对于难转染的细胞，如原代或非分裂细胞，采用病毒递送外源基因的方式是非常有效的选择。采用293A腺病毒包装细胞系(含有腺病毒包装所必需的E1基因序列，是专为生产腺病毒和进行滴度测定而建立的)，用于高滴度的复制缺陷型(E1和E3缺失)腺病毒的生产，以进行外源基因的表达。
2.实验流程
(1)构建表达基因的腺病毒载体
(2)采用PacI消化纯化的质粒。
(3)消化好的腺病毒表达载体转染293A细胞，收获细胞以制备病毒粗提液。
(4)将病毒粗提液感染293A细胞以扩增病毒。
(5)分装，-80℃保存。
3.服务说明
(1)  客户提供
目的基因的CDS序列（从NCBI中查得）。
(2)公司提供
成品：上清10 ml≥1?108~9 PFU/ml，1  ml对照≥1?1010 PFU/ml。
报告：构建载体的测序报告、病毒鉴定数据、滴度测定报告

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
9.SCI论文：SCI论文评估建议、SCI论文设计咨询、SCI论文统计资料处理、SCI论文实验操作咨询、SCI论文编修翻译等

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