内皮细胞成管实验

详情描述：

一、实验简介
血管生成在肿瘤的发展转移过程中起到重要作用。小管形成实验是测量在体外血管生成的一种快速的、可量化的方法。一般做的多的是研究内皮细胞的小管形成。内皮细胞结合条件培养基接种于一定基底上，易形成三维网状结构。然后通过图像分析软件对小管结果进行定量分析。

二、实验步骤
1、将24孔板和1ml的枪头放置冰箱或冰上预冷20-30min，从-20℃冰箱中取出Matrigel基质胶，将其置于4℃冰箱待其融化。
2、铺胶：取250 μl/孔Matrigel基质胶加入24孔板中，加入时避免产生气泡，置于细胞培养箱中60min待其凝固。
3、加入1ml 含EDTA的胰酶消化细胞，待消化完全后，加入含血清培养液终止消化，计数后用培养基重悬细胞并调整细胞密度为2-3?105个/ml。
4、待胶凝固后，取出24孔板，每孔加入500μl细胞悬液，做好标记后放入细胞培养箱常规培养4-6h。
5、100、200倍显微镜下随机5个视野观察计数血管内皮细胞小管分枝、小管数、小管长度等。统计各组间差异。
实验外包: 
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
9.SCI论文：SCI论文评估建议、SCI论文设计咨询、SCI论文统计资料处理、SCI论文实验操作咨询、SCI论文编修翻译等

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