价格 | 面议 |
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品牌 | 智立中特生物 |
区域 | 全国 |
来源 | 智立中特(武汉)生物科技有限公司 |
详情描述:
种属 人源细胞系/甲状腺、胰腺、垂体、肾上腺、扁桃体、胸腺 价格 询价 到货周期 10-15个工作日 详情描述 细胞介绍 该细胞来源于一位40岁白人男性患者的肝转移。细胞表达粘液素,Rh , HLA A2,,A9,B13,B17。含有刺激素受体和乙二醇激素受体。 细胞特性 1)来源:胰腺癌,肝转移 2)形态:上皮细胞样,贴壁生长 3)含量:>1x106 个/mL 4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 细胞接受后的处理: 1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。 2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。 4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。 细胞用途:仅供科研使用。 本公司的细胞培养操作规程,供参考 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备IMDM培养基(IMDM,GIBCO,货号C12440500BT),80%;优质胎牛血清,20%。 。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于贴壁细胞,传代可参考以下方法: 1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。 3.轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。 4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行,zui后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心,用血清重悬浮,加DMSO至zui终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
联系人 | 肖素素 |
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