智立中特生物Mo7e细胞（提供STR鉴定报告）

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Mo7e细胞（提供STR鉴定报告）
（1）英文名称：Mo7e[M-07e]
（2）中文名称：人巨细胞白血病细胞株
（3）细胞描述：该细胞系1987年建系，源于6个月龄患有急性巨核细胞白血病（AMLM7）女婴的外周血，是M-07细胞系的亚系，GM-CSF、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IL-2、IL-3、IL-4、IL-6、IL-15、NGF、SCF、TNF-α、TPO可促进细胞增殖。该细胞也可不依赖细胞因子生长，但生长缓慢。可用于测定多种细胞因子的活性。在本库通过STR鉴定正确，其鉴定结果如下：Amelogenin：X；CSF1PO：9，10；D13S317：10，11；D16S539：11；D18S51：15，20；D19S433：14，15；D21S11：30，32.2；D2S1338：19，25；D3S1358：16，19；D5S818：11；D7S820：11；D8S1179：13，16；FGA：18，22；TH01：6，8；TPOX：8；vWA：16，18；
（4）规格：T25方瓶或1ml冻存管
（5）细胞数量：1?10^6
（6）组织来源：人巨细胞白血病
（7）生长方式：悬浮生长
（8）细胞形态：淋巴母细胞样
（9）培养液：RPMI-1640 10%FBS 8ng/mL rHuGM-CSF 1%P/S
（10）培养条件：37℃，5%CO2
（11）运输方式：常温运输（T25方瓶）或干冰运输（冻存管）
细胞处理：
1） 冻存细胞的复苏：
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 
3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例；
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1?106~1?107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1?106~1?107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。