MDA-kb2人乳腺癌细胞（DMEM）（STR鉴定正确）

详情描述：

　　人乳腺癌细胞 DMEM

　　平台编号:zl-010421

　　规格:1?10?cells/T25培养瓶

　　细胞信息:MDA-kb2 DMEM

　　产品信息

　　名称MDA-kb2（人乳腺癌细胞）（DMEM）（STR鉴定正确）

　　种属人类

　　年龄（性别）女性，48岁

　　组织来源乳腺

　　生长特性贴壁

　　细胞形态上皮细胞样

　　生物安全等级1

　　生长培养基DMEM＋10%FBS＋1%P/S

　　冻存条件冻存液：55%基础培养基 40%FBS 5%DMSO温度：液氮

　　培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃

　　基因表达情况luciferase;ThecelllineexpressesfireflyluciferaseundercontroloftheMMTVpromoterthatcontainsresponseelementsforbothglucocorticoidreceptors(GR)andandrogenreceptors(AR)

　　保藏机构ATCC;CRL-2713

　　细胞培养步骤

　　一．培养基及培养冻存条件准备：

　　1）准备RPMI-1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗1%。

　　2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

　　3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

　　二．细胞处理：

　　1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

　　2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

　　对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

　　1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

　　2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

　　3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

　　4.收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1：2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中，建议冻存一支备用，后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。

　　细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。