索式提取装置CY-SXT-06食品中脂肪含量测定仪

详情描述：

从固体物质中萃取化合物的一种方法是，用溶剂将固体长期浸润而将所需要的物质浸出来，即长期浸出法。此法花费时间长．溶剂用量大、效率不高。在实验室多采用脂肪提取器(索氏提取器)来提取、脂肪提取器,就是利用溶剂回流及虹吸原理，使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取，既节约溶利萃取效率又高。萃取前先将固体物质研碎，以增加固液接触的面积。然后将固体物质放在滤纸套1内，置于提取器2中，提取器的下端勺盛有溶剂的圆底烧瓶相连，上面接回流冷凝管。加热园底烧瓶，使溶剂沸腾，蒸气通过提取器的支管3上升，被冷凝后滴入提取器中，溶剂和固体接触进行萃取，当溶剂面超过虹吸管4的高处时，含有萃取物的溶剂虹吸回烧瓶，因而萃取出一部分物质，如此重复，使固体物质不断为纯的溶剂所苹取、将萃取出的物质富集在烧瓶中。液—固萃取是利用溶剂对固体混合物中所需成分的溶解度大,对杂质的溶解度小来达到提取分离的目的.一种方法是把固体物质放于溶剂中长期浸泡而达到萃取的目的,但是这种方法时间长,消耗溶剂,萃取效率也不高.另一种是采用索氏提取器的方法,它是利用溶剂的回流和虹吸原理,对固体混合物中所需成分进行连续提取.当提取筒中回流下的溶剂的液面超过索氏提取器的虹吸管时,提取筒中的溶剂流回圆底烧瓶内,即发生虹吸.随温度升高,再次回流开始,每次虹吸前,固体物质都能被纯的热溶剂所萃取,溶剂反复利用,缩短了提取时间,所以萃取效率较高
1.萃取法提取粗咖fei因
用滤纸制作圆柱状滤纸筒,称取10g茶叶,用研钵捣成茶叶末,装入滤纸筒中,将开口端折叠封住,放入提取筒中.将150 mL圆底烧瓶安装于电热套上,放入2粒沸石,量取95%乙醇100mL,从提取筒中倒入烧瓶,安装好索氏提取装置,见图4-21.1,打开电源,加热回流2小时. 实验时能够观察到,随着回流的进行,当提取筒中回流下的乙醇液的液面稍高于索氏提取器的虹吸管顶端时,提取筒中的乙醇液发生虹吸并全部流回到烧瓶内.然后再次回流,虹吸,记录虹吸次数.虹吸5-6次后,当提取筒中提取液颜色变得很浅时,说明被提取物已大部分被提取,停止加热,移去电热套,冷却提取液. 拆除索氏提取器(若提取筒中仍有少量提取液,倾斜使其全部流到圆底烧瓶中),安装1 $ 4 9 U L$ 5?2- 113 - 紧贴器壁又要能方便放置.
2.生石灰起中和和吸水作用,以除去部分杂质.
3.粗咖fei因中的水分除之后,才能进行升华操作,否则留有的少量水分会在下一步升华开始时带来一些烟雾.
4.加热温度是升华操作成功的关键,升华过程中始终都应严格控制加热温度,温度太高,会发生炭化,影响结晶颜色,升华温度yi定要控制在固体化合物熔点以下.
5.再升华是为了使升华,再升华过程也要严格控制加热温度.
本章主要学习内容有三节。节的脂类概述中，对于脂类的种类、存在形式、测定意义及样品预处理进行介绍；D二节脂类测定方法中，以总脂测定为主要学习内容，总脂的测定方法分为两类，一类是直接测定法，主要针对游离态脂类物质的测定，主要学习两种具体方法——索氏提取法和氯仿-甲醇提取法，其中索氏提取法是学习重点，对其所有的内容都要掌握，氯仿-甲醇提取法的原理及适用范围要了解；D二类是化学处理后萃取法，针对非游离状态的结合态脂类进行测定，主要掌握酸水解法，了解三种乳脂肪的测定方法，这三种测定方法均为酸水解或碱水解法。D三节食用油脂指标的测定中，只需掌握碘价、酸价、过氧化值、羰基价等概念即。
节 脂类的概述
一、食品中的脂类物质和脂肪含量：
脂类为俗称。检测标准中常以“总脂”或“正乙烷或乙mi可提取物”等术语来体现。
脂类分为真脂和类脂。真脂：包括脂肪/油脂；类脂：包括脂肪酸、磷脂、糖脂、甾醇等。多数动、植物食品都含天然脂肪或类脂化合物。
食品中脂肪存在形式：食品中脂肪有游离态存在形式的，如动物性脂肪及植物性油脂；也有结合态的，如天然存在的磷脂、糖脂、脂蛋白及某些加工品（如焙烤食品及麦乳精等）中的脂肪，与蛋白质或碳水化合物形成结合态。对大多数食品来说，游离态脂肪是主要的，结合态脂肪含量较少。
植物性或动物性油脂中脂肪含量Z高，水果蔬菜脂肪含量很低。几种食物100 g中脂肪含量(g)如下：
猪肉(肥) 90.3 核桃 66.6
花生仁 39.2 青菜 0.2
柠檬 0.9 苹果 0.2
牛乳 3 以上 香蕉 0.8
全脂炼乳 8 以上 全脂乳粉 25～30
以上这些脂类含量一般是指用乙mi提取的脂类总量。
二、脂类物质的测定意义
脂肪是食品中重要的营养成分之一，为人体提供必需脂肪酸；是脂溶性维生素良好溶剂；脂蛋白参与人体代谢；脂肪是一种富含热能营养素，每克脂肪在体内可提供 37.62 kJ (9 kcal) 热能，是食物中能量Z高的营养素；在食品加工生产过程中，原料，半成品，成品的脂类含量对产品风味、组织结构、品质、外观、口感等都有直接影响，所以脂肪含量是一项重要控制指标。
（脂类的测定,概述，测定意义（粗脂肪测定，索氏提取器）

三、脂类的测定
脂类的测定项目很多，我们只介绍脂类总量的测定。不同来源的食品所含的脂肪在结构上有许多差异，所以没有一种通用的提取剂。脂类的共同特点是在水中的溶解度小，能溶于脂肪溶剂中，再根据相似相溶的规律具体选择。
1. 乙mi：有yi定*性，但不如乙醇、甲醇、水等，溶解脂肪的能力强，应用Z多。GB中关于脂肪含量的测定都采用它作提取剂。乙mi沸点低（34.6℃），易燃。乙mi可饱和2%的水，含水乙mi在萃取脂肪的同时，会抽提出糖分等非脂成分。所以用无水乙mi作提取剂，被测样品也要事先烘干（原因要清楚）。
2. 石油mi：石油mi的沸点比乙mi高，不太易燃，溶解脂肪能力比乙mi弱，吸收水分比乙mi少，允许样品含微量的水分。有时也采取乙mi 石油mi共用。但乙mi、石油mi都只能提取样品中游离态的脂肪。
3. 氯仿-甲醇：一种有效的溶剂，对脂蛋白、磷脂提取效率较高。适用于水产品、家禽、蛋制品中脂肪的提取。
样品预处理：
（1）固体样品要粉碎，颗粒大小要合适，注意粉碎过程中的温度，防止脂肪氧化。
（2）样品要干燥，但干燥过程中要注意温度的控制，如果温度低——酶活力高，脂肪易降解，而温度高——脂肪易氧化成结合态。较理想的方法是冷冻干燥法。
（3）酸水解：对于乙mi不能渗入内部的或含结合态脂肪采用该法。
（脂类的测定,概述，测定意义（粗脂肪测定，索氏提取器）

D二节 脂类的测定方法
总脂的测定可分为：
直接萃取法：索氏提取法、氯仿-甲醇提取法
化学处理再萃取法：酸水解法、碱水解法即罗兹-哥特里法、酸水解法的巴
布科克氏及盖勃法
减法测定法：（用于脂肪含量超过80%的样品，采用去水法或去不溶杂质法，
见P101/102页
一、直接萃取法：
（一）索氏提取法（索克斯列特抽提法）（该法的所有内容都要掌握）
1. 原理：将经前处理的、分散且干燥的样品用乙mi或石油mi等溶剂回流提
取，使样品中的脂肪进入溶剂中，回收溶剂后所得到的残留物，即为粗脂肪。
粗脂肪——指残留物中除游离脂肪外，还含有色素、树脂、蜡状物、挥发油等。
（引入索氏提取器详细讲解其结构及连接方式）
2. 适用范围与特点
适用于脂类含量较高，结合态脂类含量少或经水解处理过的（结合态已转变成游离态），样品应能烘干，磨细，不易吸湿结块。
此法是经典的脂类测定方法，对于大多数样品的测定结果比较可靠。但缺点是费时长（3~24h），溶剂用量大，需要专门的仪器——索氏提取器进行检测。
3. 测定方法
（1）滤纸筒的制备：将滤纸裁成8cm?15cm大小，以直径2.0cm的大试管为模型，将滤纸紧靠试管壁卷成圆筒型，把底端封口，内放一小片脱脂棉，用白细线扎好定型，在100~105℃烘箱中烘至恒量（准确至0.0002g）。
或用直径约15cm的圆片滤纸片按以下图示方法制作滤纸筒。


（2）样品处理
a、固体样品：精密称取干燥并研细的样品 2~5g（可取测定水分后的样品)，必要时拌以海砂（防结块），无损地移入滤纸筒内。
b、半固体或液体样品：称取5.0~10.0g于蒸发皿中，加入海砂约20g于沸水浴上蒸干后，再于95~105℃烘干、研细，全部移入滤纸筒内，蒸发皿及粘附有样品的玻璃棒都用沾有乙mi的脱脂棉擦净，将棉花一同放进滤纸筒内。
（脂类的测定,概述，测定意义（粗脂肪测定，索氏提取器）

（3）索氏提取器的准备
索氏抽提取器是由回流冷凝管、提脂管、提脂烧瓶三部分所组成，抽提脂肪之前应将各部分洗涤干净并干燥，提脂烧瓶需烘干并称至恒重。
（4）抽提
将滤纸筒或滤纸包放入提脂管内，连接已干燥至恒重的脂肪接受瓶，由冷凝管上端加入无水乙mi或石油mi（30~60℃沸程），加量约为接受瓶的2/3体积，于水浴(夏天65℃，冬天80℃左右)加热使乙mi或石油mi不断的回流提取，控制每分钟滴下乙mi80滴左右，时间一般视含油量高低而定，3~24h，至抽提为止（用滤纸试）。
（5）回收溶剂及称重
取出滤纸筒，用抽提器回收乙mi，当乙mi在提脂管内将虹吸时（液位接近弯管高度时）立即取下提脂管，将其下口放到盛乙mi的试剂瓶口，使之倾斜，使液面超过虹吸管，乙mi即经虹吸管流入瓶内。按同法继续回收，将乙mi蒸出后，取下提脂烧瓶，于水浴上蒸去残留乙mi。用纱布擦净烧瓶外部，于100~105℃烘箱中烘至恒量并准确称量。
或将滤纸筒置于小烧杯内，挥干乙mi，在100 ~105℃烘箱中烘至恒量，滤纸筒及样品所减少的质量即为脂肪质量。所用滤纸应事先用乙mi浸泡挥干处理，滤纸筒应预先恒量。
4、结果计算
脂肪(％)＝(m2-m1) / m?100
m2——接受瓶和脂肪的质量（或滤纸筒和残留物质量），g；
ml——接受瓶的质量（或抽提后滤纸筒质量），g；
m——无水样品的质量，g。
5. 注意及说明
① 样品应干燥后研细，样品含水分会影响溶剂提取效果，而且溶剂会吸收样品中的水分造成非脂成分溶出。装样品的滤纸筒yi定要严密，不能往外漏样品，但也不要包得太紧影响溶剂渗透。放入滤纸筒时高度不要超过虹吸回流弯管，否则弯管上部的样品中脂肪不能提尽，造成误差。
② 对含多量糖及糊精的样品，要先以冷水使糖及糊精溶解，经过滤除去，将残渣连同滤纸一起烘干，再一起放入抽提管中。
③ 抽提用的乙mi或石油mi要求无水、无醇、无过氧化物，挥发残渣含量低。因水和醇可导致水溶性物质溶解，如水溶性盐类、糖类等，使得测定结果偏高。过氧化物会导致脂肪氧化，在烘干时也有引起的危险。
④乙mi中过氧化物的检查方法：取6mL乙mi，加2mL 10%的碘化钾溶液，用力振摇，放置1min，若出现黄色，则证明有过氧化物存在。过氧化物如:H2O2、Na2O2、CaO2、BaO2、ZnO2、 MgO2等
⑤ 提取时水浴温度不可过高，以每分钟从冷凝管滴下80滴左右，每小时回流6~12次为宜，提取过程应注意防火。
⑥ 在抽提时，冷凝管上端Z好连接一个氯化钙干燥管，这样，可防止空气中水分进入，也可避免乙mi挥发在空气中，如无此装置可塞一团干燥的脱脂棉球。
⑦ 可凭经验确定抽提是否，也可用滤纸或毛玻璃检查，由抽提管下口滴下的乙mi滴在滤纸或毛玻璃上，挥发后不留油迹表明抽提。
⑧ 在挥发乙mi或石油mi时，切忌用直接火加热，应该用电热套，电热水浴锅等。烘前应驱除全部残余的乙mi，因乙mi稍有残留，放入烘箱时，有发生的危险。
⑨ 反复加热会因脂类氧化而增重。重量增加时，以增重前的重量作为恒重。
另：因为乙mi是麻醉剂，要注意室内通风。
6、改进型直滴式抽提法（快速测油器，此部分了解）
快速测油器是在索氏提取的基础上发展起来的一种脂类测定仪器，有多种结构形式，基本工作原理是：盛有试样滤纸筒置入抽提筒，用乙mi抽提脂肪，抽净后，取滤纸筒，关三通阀，继续加热直接回收乙mi。效率高于索氏法，但仍需要3-8h，主要的区别在于比索氏法的提取管内径变大、滴口呈锯齿形、抽提筒在烧瓶中，使得温度高、烧瓶口径大，烘干时间短。
国外的快速测脂装置——特卡托脂肪测定仪是先把被测量的样品放到乙mi中浸煮提出大部分的脂肪，再将样品提升于乙mi的液面以上，用乙mi进行淋洗出样品中残余的油。
（二）氯仿-甲醇提取法（又称CM法，掌握原理和应用特性即可）
原理：将试样分散于氯仿-甲醇混合溶液中，在水浴中轻微沸腾，氯仿、甲醇和试样中的水分形成三种成分的溶剂，可把包括结合态脂类在内的全部脂类提取出来。过滤除去非脂成分，回收溶剂，残留的脂类可用石油mi提取，蒸馏除去石油mi后定量。
本法适用于结合态脂类，磷脂含量高的样品，如鱼、贝、肉、蛋、大豆及其制品。
二、化学处理后萃取法
某些食品中，脂肪被包含在食品组织内部，或与食品成分结合而成结合态脂类，如，谷物等淀粉颗粒中的脂类，面条、焙烤食品等组织中包含的脂类，用索氏提取法不能提取出来。这种情况下，可用强酸将淀粉、蛋白质、纤维素水解，使脂类游离出来，再用有机溶剂提取。
（一）酸水解法（要求全掌握）
1. 原理：将试祥与盐酸溶液一同加热进行水解，使结合或包藏在组织里的脂肪游离出来，再用乙mi和石油mi提取脂肪，回收溶剂，干燥后称量，提取物的重量即为脂肪含量。
2. 适用范围与特点：
此法适用于各类、各种状态的食品中脂肪测定。脂肪被包含成结合态或加工后的混合食品，易吸湿，不好烘干的，用索氏提取法不行的样品，效果更好。本法不适于测定含磷脂高的食品、如：鱼、贝、蛋品等。因为在盐酸加热时，磷脂几乎分解为脂肪酸和碱，当只测定前者时，使测定值偏低。本法也不适于测定含糖高的食品，因糖类遇强酸易炭化而影响测定。
3. 测定方法
（1）水解：准确称取固体样品2g于50ml大试管中，加入8mL水，用玻璃棒充分混合，加10ml盐酸。或称取液体样品10g于50mL大试管中，加10mL盐酸。混匀后于70~80 ℃的水浴中，每隔5~10min用玻璃棒搅拌一次至脂肪游离为止，约须40~50min，取出静置，冷却。
（2）提取：
取出试管加入10mL乙醇，混合。冷却后将混合物移入100mL具塞量筒中，用25mL乙mi分次冲洗试管，洗液一并倒入具塞量筒内。加塞振摇1min,将塞子慢慢转动放出气体，再塞好，静置15min，小心开塞，用石油mi-乙mi等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10~20min,待上部液体清晰，吸出上层清液于已恒重的锥形瓶内，再加入5ml乙mi于具塞量筒内振摇，静置后仍将上层乙mi吸出，放入原锥形瓶内。将锥形瓶于水浴上蒸干，置95~105 ℃烘箱中干燥2h，取出放干燥器中冷却30min后称量。
（3）结果计算：